蛋白质测定仪测定蛋白质的流程步骤

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蛋白质测定仪测定蛋白质的流程步骤
凯氏定氮法由KJELTEC于1833年提出后，经不断改进，已演变为现在的常量法、微量法、半微量以及自动定氮仪法。目前凯氏定氮法为食品标准(GB/T5009.5-2003)中蛋白质的测定方法，但该法前处理消化费时，大批量样品的消化和测定较为困难，操作繁琐，蒸馏容易倒吸，并且滴定时易受人为视觉误差的影响。蛋白质测定仪则具有操作简单、省时快速、准确等优点，已在食品、肥料、饲料等多领域的氮素测定中得到广泛应用。
样品消化
准确称取一定量的样品(称准至0.0001g)移入消化管中，添加适量催化剂，加入12mL浓硫酸盖上涤气盖。将消化管放入已预热至420e的消化器上进行消化，消化至全部样品变为透明的蓝绿色澄清液体，同时将抽气泵水龙头打开，排除消化时产生的废气。根据样品种类消化时间在30~60min。消化完毕，冷却15~20min，蒸馏测定。
2.2蒸馏测定原理
自动定氮仪法的原理与国标法相同，即样品经消化后，蛋白质中的氮转化为氨并与硫酸结合生成硫酸铵，然后加碱蒸馏，使氨蒸出，用硼酸吸收后用盐酸标准溶液滴定，根据盐酸标准溶液的消耗量，计算出氮的量，乘以换算系数6.25，即为蛋白质含量。
2.3测定
将已消化好的样品消化管直接放入自动定氮仪上按仪器的要求进行蒸馏测定，同时做空白实验。整个测定过程蒸馏、滴定、数字处理仅需4~5min即可完成。
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