验证有效siRNA

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发布日期
2014-10-11 16:32
编号
2314936
发布IP
61.144.92.50
区域
广州医药保健品
地址
广州开发区科学城科学大道182号创新大厦C3区13-14层
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详细介绍

产品简介:
针对常见基因验证有效的siRNA,经过qPCR有效性验证,确保70%以上的mRNA水平沉默效率。
产品描述:
锐博生物提供的验证有效siRNA均经过特定细胞系实验,并qPCR水平验证,保证相同条件下能够沉默靶基因表达。但由于细胞系差异,转染效率各不相同,无法保证在所有细胞系均具有同样的沉默效率。
SiRNA简介:Small interfering RNA (siRNA):是一种小RNA分子(~21-25核苷酸),由Dicer(RNAase Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶)加工而成。SiRNA是siRISC的主要成员,激发与之互补的目标mRNA的沉默。
RNA干涉(RNAinterference,RNAi)是指内源性或外源性双链RNA(dsRNA)介导的细胞内mRNA发生特异性降解,从而导致靶基因的表达沉默,产生相应的功能表型缺失的现象.
siRNA表达框架(siRNA expression cassettes,SECs)是一种由PCR得到的siRNA表达模版,包括一个RNA pol III启动子,一段发夹结构siRNA,一个RNA pol III终止位点,能够直接导入细胞进行表达而无需事前克隆到载体中。和siRNA表达载体不同的是,SECs不需要载体克隆、测序等颇为费时的步骤,可以直接由PCR得到,不用一天的时间。因此,SECs成为筛选siRNA的最有效工具,甚至可以用来筛选在特定的研究体系中启动子和siRNA的最适搭配。如果在PCR两端添加酶切位点,那么通过SECs筛选出的最有效的siRNA后,可以直接克隆到载体中构建siRNA表达载体。构建好的载体可以用于稳定表达siRNA和长效抑制的研究。
这个方法的主要缺点是①PCR产物很难转染到细胞中(晶赛公司的Protocol可以解决这一问题)②不能进行序列测定,PCR和DNA合成时可能差生的误读不能被发现导致结果不理想。
最适用于:筛选siRNA序列,在克隆到载体前筛选启动子
siRNA:http://www.ribobio.com/
验证有效siRNA:http://www.ribobio.com/sitecn/Product_44.html

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