谷物中赭曲毒素-A检测试剂盒

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谷物中赭曲毒素-A检测试剂盒
941OCH01M
（请以英文为准中文仅供参考）
概述
赭曲毒素-a是由黄曲霉、青霉菌、赭曲霉产生的一种有害的代谢毒物，是一种肾毒素和致癌物。在食品和饲料中经常检测到赭曲毒素-a，但主要是谷物类产品。人如果长期接触赭曲毒素a，将导致患一种肾系统肿瘤相关性疾病。动物长期接触赭曲毒素a的后果也很严重，有报道称接触赭曲毒素a的猪发生了肾功能损伤，接触赭曲毒素a的火鸡和鸡生长发育不良、发生肾病，绝食、产蛋量和蛋壳质量下降甚至死亡。
适用
Helica 公司赭曲毒素a检测试剂盒的原理是竞争酶联免疫法，用于定量检测谷物、加工过的谷类食物、咖啡和其它动物饲料中的赭曲毒素a。
原理
Helica™ 公司赭曲毒素a测定法是一个固相直接竞争酶联免疫测定法。把赭曲毒素a特异性抗体包被在聚苯乙烯微孔底部。利用70%甲醇提取样品中的赭曲毒素a，然后把提取的样品和辣根过氧化物酶标记的赭曲毒素a结合物加入到包被有抗体的微孔中。样品中的赭曲毒素a和辣根过氧化物酶结合物竞争与包被的抗体结合。轻轻倒出微孔中的内容物并洗孔，加入酶作用底物TMB显蓝色，颜色的深度和结合物的数量程正比，和样品或标准中的赭曲毒素a成反比。
因此，当样品或标准中的赭曲毒素a的量增加时，蓝色的深度降低。加入酸性终止液使微孔中的颜色从蓝色变为黄色。在OD450条件下下测定其吸光度，样品的吸光度和试剂盒中标准的吸光度进行比较 ，测定出结果。
试剂盒组成
1. 真空包装微孔板：（12×8）包被有赭曲毒素a抗体
2．预混板：（12×8条）
3．标准：赭曲毒素a标准，六瓶，每瓶1.5ml，浓度为0.0、0.4、1.0、2.0、4.0、8.0 ng/mL
4．酶结合物： HRP标记的赭曲毒素a 结合物，2瓶，每瓶12ml
5．底物溶液(TMB)：1瓶，15 mL
6．终止液：1瓶，15 mL
样品提取步骤
注意：样品必须根据已经建立的采样技术进行。
1.配制提取液(70%甲醇)，70mL甲醇溶于30mL的去离子水中（每个样品）
2. 研磨样品（能使50%的样品通过20目的滤网）
3. 称20 g 过滤的样品加入 100 mL 提取液（70%甲醇），稀释倍数1：5
4. 混匀至少3min.
5. 使用滤纸过滤5-10mL上一步处理的液体，允许颗粒物沉淀下去。收集滤液待测
测定步骤
注意：推荐使用多道移液枪，如果使用单道移液器时检测的样品不应该超过16个样品。
1、使用前将试剂拿到室温。
2、将装试剂的小袋开封，根据待测的标准品和样品的数量取出一定量的微孔。同时取出相同数量的没有包被抗体的预混板。
3、将不使用的微孔重新放入小袋，封好口避