人激肽释放酶1(KLK1) ELISA试剂盒操作流程:先将试剂盒从冰箱内取出室温平衡20~30分钟后,根据实验要求取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。设置标准品孔和样本孔,在标准品孔各加不同浓度的标准品50ul,在样本孔中加入待测样本50ul(空白孔不加)。随后在标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100ul。用封板膜封住反应孔,37摄氏度的恒温箱温育60分钟。进行洗板(也可用洗板机洗板):弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液静置1分钟,再甩去液体,吸水纸上拍干。如此重复洗板5次。在每孔加入底物A、底物B各50ul,37℃避光孵育15分钟。每孔加入终止液50ul,15分钟内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
人激肽释放酶1(KLK1) ELISA试剂盒需要自备仪器及设备:
1)450nm滤光片酶标仪(Standard microplate reader)
2)高精度加样器及枪头(Precision pipettes and Disposable pipette tips.)
3)37摄氏度恒温箱(37 ℃ incubator)
人激肽释放酶1(KLK1) ELISA试剂盒性能指标:( 仅供科研使用,不得用于临床诊断。)
【物理性能】: 试剂盒的各液体组分应澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装,无破 损漏气。
【剂量反应曲线线性】: 校准品剂量反应曲线相关系数 r 值,大于等于 0.9900。
【精密度】: 批内精密度:三组已知的高、中、低浓度样品,进行二十次在同一个板块内精度评估。 批内变异系数 CV%小于 10%。 批间精密度:三组已知的高、中、低浓度样品,进行二十次在不同板块内精度评估。批 间变异系数 CV%小于 15%。
【灵敏度】: zui低检出剂量小于 (详情请见说明书)。
【回收率】: 三组已知的高、中、低浓度样品,进行五次在同一个板块内回收率评估,回收率在 85%-115% 之间。 