线粒体膜电位检测试剂盒

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产品货号：M8650
产品规格：100T
产品内容：
保存条件：
-20 ℃避光保存，尽量避免反复冻融，有效期一年。 超纯水和 JC-1 染色缓冲液（5 ×）也可 4 ℃保存。
产品简介：
线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1 ）是一种以 JC-1 为荧光探针，快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒，可以用于早期的细胞凋亡检测。
JC-1 是一种广泛用于检测线粒体膜电位 Ψm △ 的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时，JC-1 聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可以产生红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-1 不能聚集在线粒体的基质中，此时 JC-1 为单体，可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。
线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过 JC-1 从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用 JC-1 从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。
JC-1 单体的最大激发波长为 515nm ，最大发射波长为 529nm ；JC-1 聚合物的最大激发波长为
585nm ，最大发射波长为 590nm 。实际观察时，使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。
本试剂盒提供了 CCCP 作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。对于六孔板中的样品，本试剂盒共可
以检测 100 个样品；对于 12 孔中的样品，本试剂盒共可以检测 200 个样品。
操作步骤： ：： ：
1、 、、 、JC-1 染色工作液的配制： ：： ：
六孔板每孔所需 JC-1 染色工作液的量为 1mL ，其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推；
对于细胞悬液每 50～100 万细胞需 0.5mL JC-1 染色工作液。取适量 JC-1 （200×）， 按照每 50µL JC-1 （200
×）加入 8mL 超纯水的比例稀释 JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入 2mL JC-1 染色缓冲
液（5 ×），混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、 、、 、阳性对照的设置 阳性对照的设置： ：： ：
把试剂盒中提供的 CCCP（10mM ）推荐按照 1 1000 ∶ 的比例加入到细胞培养液中，稀释至 10µM ，处理
细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ，进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞，通常 10µM CCCP
处理 20 分钟后线粒体的膜电位