人单胺氧化酶ELISA试剂盒供应

人单胺氧化酶(MAO)ELISA试剂盒试剂准备：

试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

1. 标准品复溶：试剂盒提供6管标准品，每管已标定浓度，并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动助其溶解，使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。

2. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

操作步骤：

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃;

2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3. 待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；

4. 随后标准品孔和样本孔中（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6. 所有孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 所有孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。




注意人单胺氧化酶(MAO)ELISA试剂盒事项： 　　

1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。 　　

2. 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。 　　

3. 一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 　　

4. 请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。 　　

5. 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数。 　　

6. 在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。 　　

7. 底物请避光保存。  




人单胺氧化酶(MAO)ELISA试剂盒酶标仪的使用过程中的一些问题：

1．阈值可疑范围的设定 一般酶标仪阈值矩阵设定可设定阴性、可疑、阳性3个范围。有经验表明可疑范围的设定要设定为临界上下15％（也称灰色区）为宜；同时阴性范围下限和阳性范围应该充分考虑到影响ELISA结果因素的存在，可疑范围上限必须考虑到双波长情况下出现负吸光度值和超范围报告影响结果的可能性。“灰色区"的结果的真实性是ELISA定性测定中最需要把握的环节，也是实验室引起医疗纠纷的主要方面，因此必须对可疑结果进行复检，**用两种试剂盒。

2．样板程序文件设定 一个实验室同一试验可能使用不同厂家试剂盒，但不同试剂盒规定的设定对照数量、阈值判定标准等均可能不一致，酶标仪所设样板程序也不一致